
标题:Abasic phosphoramidite 129821-76-7
一、化学试剂的基本信息
保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
英文名称:Abasic phosphoramidite;dSpacer CE Phosphoramidite
中文名称:无碱基亚磷酰胺
CAS:129821-76-7
分子式:C35H45N2O6P
分子量:620.73
规格标准:该试剂的纯度通常达到95%以上,规格包括1mg、5mg、10mg等,也可按需包装。
生产信息:陕西新研博美
二、基本定义
Abasic phosphoramidite(又称 dSpacer CE Phosphoramidite 或 无碱基亚磷酰胺)是一种专门用于DNA和寡核苷酸自动合成的化学修饰单体。其核心功能是提供一个“无碱基”的间隔位点,即在合成的DNA链中引入一个既没有嘌呤也没有嘧啶碱基的糖环结构,从而模拟DNA损伤中的脱碱基(abasic)位点或作为非互补的间隔臂。
结构组成
糖骨架:1',2'-脱氧核糖(dideoxyribose)衍生物,作为DNA链的骨架连接点。
5'-保护基团:5'-O-二甲氧基三苯甲基(5'-O-DMT)。该基团保护了糖环5'位的羟基,确保合成过程中反应的特异性,并在合成完成后通过酸处理脱去以进行偶联或纯化。
3'-反应位点:3'-[(2-氰乙基)-(N,N-二异丙基)]-磷酰胺基团。这是亚磷酰胺化学合成法中的标准反应基团,负责在氧化步骤中与前一核苷酸的3'位羟基连接,形成磷酸二酯键。
碱基缺失:糖环的1'位没有连接常规的含氮碱基(A、T、C、G),这是其“无碱基”特性的来源,使得该位置无法与互补链发生碱基配对。
三、功能优势
相比于普通的柔性间隔臂(如C3 Spacer),Abasic Phosphoramidite具有独特的生物学和结构优势:
模拟生理损伤:能够精确模拟DNA中由去嘌呤化(depurination)或氧化损伤引起的天然“无碱基”位点(AP sites),是研究DNA修复机制、DNA聚合酶错误倾向性以及碱基切除修复(BER)途径的理想工具。
保持骨架连续性:与普通碳链间隔臂(如C3, C9)不同,dSpacer保留了完整的脱氧核糖结构。这意味着它在DNA双螺旋中占据的空间更接近天然核苷酸,对DNA二级结构的扭曲和立体阻碍最小,不会像长碳链那样导致链的过度弯曲或骨架断裂。
阻断碱基配对:由于缺乏碱基,该位点会阻断聚合酶在特定位置的延伸,常用于构建“缺口”(gap)或研究聚合酶在遇到损伤时的停滞行为。
合成兼容性:其偶联条件和脱保护条件与标准核苷酸完全相同,可直接使用自动化DNA合成仪进行常规合成,无需修改合成程序。
应用特点
Abasic Phosphoramidite在分子生物学和化学生物学领域有广泛的应用,主要包括:
DNA损伤研究:用于合成含有特定位置脱碱基位点的寡核苷酸,研究细胞内DNA修复酶(如APE1, DNA glycosylases)对AP位点的识别和切割机制。
突变机制分析:研究在DNA复制过程中,当模板链出现无碱基位点时,DNA聚合酶倾向于插入何种碱基(倾向于插入腺嘌呤,即“A规则”),从而解析突变起源。
探针与标记设计:作为非标记的间隔臂,用于调节荧光基团、淬灭剂或亲和素(如生物素)与DNA末端的距离,优化FRET(荧光共振能量转移)效率或减少空间位阻。
反义与siRNA技术:在某些情况下,引入无碱基位点可调节寡核苷酸与靶标RNA的杂交强度,或作为特定的酶切位点(尽管更多是利用其阻断特性)。
结构生物学:用于制备用于NMR或晶体学研究的不完整DNA双螺旋,探究碱基对缺失对双螺旋结构稳定性(Tm值)的影响。
四、新研博美目录列表:
Alkyne-PEG6-NHS
GelGreen
Endo BCN-PEG18 NHS Ester
BHQ-1 NHS
Fluorescein-PEG6-bis-NHS ester
Biotin-PEG3-Azide
Biotin-PEG4-Dde-TAMRA-PEG3-Azide
sulfoCyanine 3 NHS Ester
Cyanine7 NHS ester
Biotin-PEG2-azide
ATTO 514-Biotin
Azide-PEG2-amine
R6G alkyne, 6-isomer
HMSiR-Amide-Me
BDP 558/568 NHS ester
PLGA-NH2 PLGA-NH2
温馨提示:
试剂仅用于科研实验,不可用于人体~~~~~编辑作者:陕西新研博美木南
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